elisa試劑盒白介素類的主要試劑為固相的抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體和與標(biāo)記酶直接關(guān)聯(lián)的酶反應(yīng)底物。以下敘述這些試劑的原料和制備方法。
固相的抗原或抗體稱為免疫吸附劑。將抗原或抗體固相化的過(guò)程稱為包被(coating)。由于載體的不同,包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板為載體,通常將抗原或抗體溶于緩沖液(zui常用的為pH9.6的碳酸緩沖液)中,加于ELISA板孔中在4℃過(guò)夜,經(jīng)清洗后即可應(yīng)用。如果包被液中的蛋白質(zhì)濃度過(guò)低,固相載體表面有能被此蛋白質(zhì)*覆蓋,其后加入的血清標(biāo)本和酶結(jié)合物中的蛋白質(zhì)也會(huì)部分地吸附于固相載體表面,zui后產(chǎn)生非特異性顯色而導(dǎo)致本底偏高。在這種情況下,如在包被后再用1%~5%牛血清白蛋白包被一次,可以消除這種干擾。這一過(guò)程稱為封閉(blocking)。包被好的ELISA板在低溫可放置一段時(shí)間而不失去其免疫活性醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
ELISA中所用的酶要求純度高、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高、專一性強(qiáng)、性質(zhì)穩(wěn)定、來(lái)源豐富、價(jià)格不貴、制備成的酶標(biāo)抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定,繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力。在受檢標(biāo)本中不存在與標(biāo)記酶相同的酶。另外它的相應(yīng)底物應(yīng)易于制備和保存,價(jià)格低廉,有色產(chǎn)物易于測(cè)定,光吸收高。elisa試劑盒白介素類中常用的酶為辣根過(guò)氧化酶(HRP)和從牛腸粘膜或大腸桿菌提取的堿性磷酸酶。
LPLUNC1 磷酸化緊密連接蛋白6抗體
LPP/LIM protein 磷酸化結(jié)蛋白抗體
LRIG1 磷酸化結(jié)蛋白抗體
LRIG2 磷酸化接頭蛋白Gab2抗體
LRIG3 磷酸化接頭蛋白Gab2抗體
LRP/MVP 磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體
LRP1/CD91 磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體
Lrp2/Megalin 磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體
LRP6 磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體
LRRC4 磷酸化接頭蛋白CrkL抗體
LRRK2 磷酸化接頭蛋白CrkL抗體
elisa試劑盒白介素類