ELISA試劑盒檢測過程中的常見問題以及解決方法
ELISA試劑盒檢測過程中的常見問題還是很多的下面所提到的是我司在檢測過程中所遇到的一些ELISA產(chǎn)品會(huì)出現(xiàn)的問題及解決方法:
1. 加入反應(yīng)終止液后，沒有吸光值或吸光值偏低。
a.原因：未加入酶標(biāo)記物。
解決辦法：請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行。
b.原因：試劑盒內(nèi)容物未能充分回。
解決辦法：確定試劑盒內(nèi)容物回溫后再進(jìn)行操作。
c.原因：室溫太低。
解決辦法：若室溫太低(<19℃)，請(qǐng)于操作步驟4，適當(dāng)延長溫育時(shí)間。
d.原因：未使用試劑盒的清洗液清洗。
解決辦法： 請(qǐng)用試劑盒內(nèi)所提供的清洗液清洗。
e.原因：試劑盒已過有效期限。
解決辦法：請(qǐng)更換成仍在有效期限內(nèi)的試劑盒。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳，或是平行性不好。
a.原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
解決辦法： 請(qǐng)確認(rèn)溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。
b.原因：操作時(shí)間拖太久。
解決辦法：請(qǐng)?jiān)诜椒ㄊ炀毢笤龠M(jìn)行操作。
c.原因：微孔間相互污染。
解決辦法： 加樣品時(shí)，請(qǐng)小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。
d.原因：標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記物所加入的量不一致。
解決辦法：請(qǐng)使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。
e.原因：添加樣品或試劑的操作方法不正確。
解決辦法：加樣品或試劑時(shí)，吸頭請(qǐng)勿接觸微孔。
f.原因：洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進(jìn)行下一步驟)。
解決辦法：請(qǐng)隨時(shí)監(jiān)控洗板機(jī)洗板過程，洗完后立即進(jìn)行下一步驟。
3. 吸光值均偏高(或線性不夠陡)。
a.原因：室溫太高(>25℃)。
解決辦法： 若無法降低室內(nèi)溫度，請(qǐng)適當(dāng)縮短步驟4的溫育時(shí)間。
b.原因：底物溶液受到污染。
解決辦法： 若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色，請(qǐng)不要再使用。
c.原因：反應(yīng)時(shí)間超過太久。
解決辦法：請(qǐng)控制反應(yīng)時(shí)間。
d.原因：酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑。
解決辦法：使用過的吸頭應(yīng)立即丟棄，可避免試劑間相互污染，凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過的容器應(yīng)立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡，再以清水沖洗干凈，可確保無殘留)
4. 陰性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值低于陽性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值。
a.原因：微孔中的試劑未能充分混合。
解決辦法： 試劑加完后，需輕敲盤四周使其充分混合均勻。
b.原因：洗板過程發(fā)生問題。
解決辦法：請(qǐng)隨時(shí)監(jiān)控洗板機(jī)洗板過程，洗完后立即進(jìn)行下一步驟。
c.原因：添加樣品或酶標(biāo)記物的量不一致。
解決辦法： 請(qǐng)使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。
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