人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)Elisa試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到
100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)
腫瘤壞死因子-a(TNF-a)
可溶性細(xì)胞間黏附因子-1(sICAM-1)
可溶性血管間粘附因子-1(VCAM-1)
白介素-6(IL-6)
白介素-8(IL-8)
高敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)
內(nèi)皮素(ET)
一氧化氮(NO)
血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)
血管緊張素I (腎素、AngI)
醛固酮(ALD)
基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)
氧化低密度脂蛋白(ox_LDL)
可溶性細(xì)胞表面分化抗原40配體(sCD40L)
脂聯(lián)素(adiponectin)
組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)
纖溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)
E-選擇素(E-Selectin)
P-選擇素 CDp62 血小板活化
同型半胱氨酸
血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)