【摘要】:影響ELISA試劑盒SCI文章中非特異性顯色的原因很多,如盒特異性、檢驗標(biāo)本中含酶標(biāo)記物的干擾物,操作過程中的問題。本文就這一原因作一簡要分析,以便可以通過以上措施把非特異顯色降至zui低限度,從而提高檢測的特異性,并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。
【關(guān)鍵詞】 ELISA 非特異性 顯色
酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)自1971年自問世以來,以其敏感性高,特異性強(qiáng),操作簡便、安全,而廣泛應(yīng)用于臨床診斷,開創(chuàng)了免疫學(xué)診斷的新紀(jì)元。但同其它免疫診斷方法一樣酶免在它的研究、及使用中常常會碰到非特異性問題,本文就在實驗過程中產(chǎn)生的一些原因及如何采取一些措施,消除非特異性顯色作一分析。
1、盒特異性因素
1、1 固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種,以微量滴定板zui為常見[1]。它具有良好的吸附性能,孔底透明度高,空白值低,各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。因此,在選擇盒同時要對其使用的微孔板型號進(jìn)行認(rèn)證,評估。
1、2包被物的純度。在酶聯(lián)免疫測定尤其是間接ELISA中,的特異性取決于使用抗原的純度。目前由于技術(shù)條件的限制,包被用抗原或的純度不可能達(dá)到100%,所以有些非特異性顯色不可避免,只能盡可能提高純度,提高特異性。目前使用的包被抗原一般為合成多肽抗原。
1、3包被的效價。具有高親和力和高特異性的包被,是決定特異性的重要方面。
1、4 封閉。是ELISA試劑盒SCI文章中重要的一步,目的是封閉固相載體表面尚未被所占據(jù)的空隙[2],減少后續(xù)步驟中非特異性蛋白的干擾。
HPLC≥98% α-倒捻子素 20mg/支 α-mangostin
HPLC≥98% β-倒捻子素 20mg/支 β-mangostin
HPLC≥98% 3-異倒捻子素 20mg/支 3-isomangostin
HPLC≥98% 菊苣酸 20mg/支 Cichoric Acid
HPLC≥98% 梭砂貝母堿 10mg/支
HPLC≥98% 地膚子皂苷Ic 20mg/支 Momordin Ic
HPLC≥98% 大薊苷(柳穿魚葉苷) 20mg/支 Pectolinarin
HPLC≥98% 2”-O-沒食子酰基金絲桃苷 20mg/支 2"-O-galloylhyperin
HPLC≥98% 9-甲氧基喜樹堿 20mg/支 9-methoxycamptothecine
HPLC≥98% 鹽酸石蒜堿 20mg/支 Lycorine chloride
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